脐带间充质冻存

湖南干细胞

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; ?+ }8 r+ u! d1 ]4 N% {; u谢谢，我试试。

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4 n( D1 ?( O1 c$ j0 X' P/ u# p6 r# h" t0 g& G- j$ h0 O3 D6 C: _
谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子* @, v# D- T) g. u5 u2 C; j6 f$ J
' P; s! ?" K6 f/ @
用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

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回复 山风 的帖子' F# H: Q5 t' L- I; F6 G- r

( j5 |0 ~) X8 r谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶
3 C% L+ C6 X2 h6 d0 P+ h复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

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回复 xiaolong 的帖子% n: I( e$ x0 J  S( u! ~# g* B
7 e6 r: K3 b1 L
这个主意好，谢谢

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回复 猩猩 的帖子/ O" ]8 S! g9 l1 e# n" p9 x( m

# ?0 G: q  l; C# V& k好的。0 _7 {4 i1 y8 a! a: k

湖南干细胞

回复 山风 的帖子
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7 M3 c: u* `' ~1 w# b7 X今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？' e. e: {5 ]- t& m; V, i3 [
“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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7 y! h9 f4 t+ y" m" n; y- X
冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。