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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑
9 ~& }+ m+ o) `/ C, b
+ ?: s# n- |$ f2 }请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
& c) w  U' X" G2 ~3 v1 Z
多聚赖氨酸玻片如何处理?0 W% A" V9 m9 b# }0 z, I2 Z% O5 `  z
          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:6 Z) w2 ^: Q. j) K3 G% |
1 C/ c! S( Z, J/ B7 _
        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。. c& f/ J! M5 {

* J* K/ ~2 ^" i2 {. M        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
5 ?2 ?* N( {' J/ S2 K# @! o% m- b6 T0 s
, L' |- Z; d2 s6 S% Q, D4 |: l        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
' [: n0 }. U  C9 T6 K  g9 ]) P2 v
# b$ J$ T0 T* j5 [  |( H5 `/ S        (4)取出后放在无尘的地方晾干。% _! i2 z1 v: G* n+ ?
: ?( B+ u- K! u1 V
        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。2 C8 I9 V( h# G4 r

6 c, M; v+ c' V        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。6 f$ K2 Q" M# O9 l

" d1 h; H7 l8 Z4 R* x; V        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
6 B. r$ T0 s: z% @& U0 t) D! O; H) `9 A" X" k: X, C
8 J9 H. Y: m2 j

" y: @" N( G4 e8 H* A  k; e+ L        固定的原理:, B  R, y) p4 U' u7 V9 s

& s1 O" a# P! c9 }        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
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wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑
* {5 n% J5 A* Q# [
/ D$ ~6 ~  E4 K: l! c回复 wf78365421 的帖子
8 L% ]5 o) G" X9 c8 @
2 j- S' Y) d& O5 _1 _  x谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子
7 O* O1 H. U" f1 b! I
+ ]9 A& C" l6 z! f4 S2 e你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样5 V6 i' e2 t6 I9 X/ h$ ^
1 r5 s( O5 E+ {/ b
否则他会看不到

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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