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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑 3 j, Q; k- N. U) b
. O4 P  _/ `6 j
请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
7 V. Q1 L, d. X. }" b
多聚赖氨酸玻片如何处理?2 Y1 y5 L4 }& M
          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:
- q; r4 }1 b* t9 N% h# M0 r7 A/ _0 L9 m& [# v; K
        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。/ w0 f5 R( p' B5 x  k: X: `

- T) A4 d: Q3 P! j7 J! k( Q4 g        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。# ]/ M( l1 v2 A) j0 ?1 e6 ?) h

/ m; w1 C2 f8 \% d' h        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。; x8 ]  G. F9 V6 f

4 B( s8 [% ^( {4 |7 {: o, \        (4)取出后放在无尘的地方晾干。$ i, n6 V$ X  |, A4 K  B# E

$ {/ Z1 X* @* V  n        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。' ~0 h5 U0 V" g! a, Y7 h+ K4 }
3 f# B9 R0 t+ K! h& o8 s- {3 c$ l
        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。" z5 l# H0 z0 M% E% X$ J

; p: T: s+ `2 P0 K) M        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
- p7 B9 I- P% u3 }6 q: E" O5 j
& m" |. A( x3 M) {' t # `* z* W( F* s) m' \
2 Z: u& T5 a  K1 P* c" q
        固定的原理:7 _( T1 Z  L" W, N
7 T9 z: X6 ~! B
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
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wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑
5 m9 ~4 Y2 S* f/ L& V7 M% @( M0 C# Y4 q. D" }+ Q/ G! |
回复 wf78365421 的帖子& s) t: R; t' C, H
" V, Q% A8 W: |/ {' q
谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子
$ S0 f3 s$ h% X2 ^8 B" Y; x) ?) h: ?' t' u! U1 v# u0 r
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
4 j! m$ Z* Y! J! A3 [5 ]+ i
! ?8 j2 T3 q- a  R否则他会看不到

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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