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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑 0 D1 D1 r! E' I% P. t5 _% ~3 [

) w' }% o0 I/ a' U% b% |请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
8 v+ m# @& i1 {5 f* |  e( |/ ~! U
多聚赖氨酸玻片如何处理?
3 h" T: z* |/ w; p% t; w          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:
2 B/ V. S1 h. {: s
0 O) N5 S5 G/ w) e3 m" ], F) ?        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。+ b4 [* D2 ?. N4 K# U; T- }

! F! n5 {+ O! Q0 L2 r        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。  a) G7 i! J! S& O9 f3 `3 N$ `

3 C; y/ n  ^& z9 o        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。3 l, L+ e6 o' K7 q; ~
2 F: r  q4 P% [" f* S4 {
        (4)取出后放在无尘的地方晾干。9 k$ W5 U, @$ R% `/ X

5 u2 d! a9 J% ?        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
  ?' m  `6 z0 `+ b: Q6 j/ p! A2 y" w8 V$ l5 u1 i
        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。; m4 g' b) N( J
% M: H2 _$ R5 x
        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
: u' R8 a- @- C
: y5 i' c  {6 O. s6 b8 U
' q/ Y- u+ S' c. s" Z9 c
1 d+ D8 j) B' ?1 w) |3 T        固定的原理:9 q+ ~& L5 W" ~9 y4 F2 l# S
( ]  z! i% k$ \3 X
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
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wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑 7 H7 P6 v* ^% E3 K3 V  j; U! c2 j/ D
( n: u7 S& g9 j! `$ M( w
回复 wf78365421 的帖子. L; u8 _9 t! r9 ~0 j) X

0 W; u# S+ W6 I/ g9 [9 j谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子
$ R0 k) a# ^3 \# r$ q  s; O' y' J' Y7 Q
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样* K/ U+ K: ?- |4 b/ L, o
' h9 d/ ~7 n/ o: ]- l* p
否则他会看不到

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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