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多聚赖氨酸玻片如何处理?
3 h" T: z* |/ w; p% t; w 多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:
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0 O) N5 S5 G/ w) e3 m" ], F) ? (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。+ b4 [* D2 ?. N4 K# U; T- }
! F! n5 {+ O! Q0 L2 r (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。 a) G7 i! J! S& O9 f3 `3 N$ `
3 C; y/ n ^& z9 o (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。3 l, L+ e6 o' K7 q; ~
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(4)取出后放在无尘的地方晾干。9 k$ W5 U, @$ R% `/ X
5 u2 d! a9 J% ? (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。
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(6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。; m4 g' b) N( J
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(7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。
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1 d+ D8 j) B' ?1 w) |3 T 固定的原理:9 q+ ~& L5 W" ~9 y4 F2 l# S
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细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。 |
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