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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |正序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑
( E' ?& J, P# m9 K$ C
+ z" h3 n/ t* J2 |- A1 E请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
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回复 aminhair 的帖子( M& g! S& Q3 h3 ?7 ^' `7 h

6 ^2 P' M& d- S3 E' h6 M  s你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
3 R- {' N7 |& b0 @% l7 }; ~% X: z" f( b, ~2 O
否则他会看不到

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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑 . k2 U! m+ U9 g7 f) F

. q* ]; Q4 q$ ~  l5 |回复 wf78365421 的帖子
7 ^/ s1 _! P1 G4 d. @, J, ^1 ^: B  b. B1 H. D# }  V) I( P# C
谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
4 E7 ?1 Y4 [9 O; T/ M- O8 `
多聚赖氨酸玻片如何处理?
/ J9 ^% O# Y: g  X          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:( g. ^: b' R) w" P% x

; Q3 r) ^1 Y& |- ?4 g8 t        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
1 T  {- k% K5 k
# r: M9 X! f" J; Y) b        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
  f: E4 \3 v3 N3 m% P7 N2 f! r6 E
        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
- `7 K; ~' j8 F) B+ {7 b' t% T9 l) N  q2 K
        (4)取出后放在无尘的地方晾干。
" k  j* f. |* q" B% c: F0 m5 T! r8 D+ T+ c
        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。, h' S& q$ o, j, a/ \6 v' G) A& |
8 E' ~( J0 J- Q
        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。. x* x6 e  l* l3 w/ l

6 P4 b. i3 _% [' d) p& e" t        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。" n9 L' z1 j, I* f/ j
+ w$ x' k4 ]3 O

6 {6 ^+ J  J9 H: e
/ n- }* X( m# p- |' M        固定的原理:
$ Z: u6 ]- p3 ]/ y9 [& U7 z, A6 t, P$ v; @* j9 i5 g
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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