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多聚赖氨酸玻片如何处理?
/ J9 ^% O# Y: g X 多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:( g. ^: b' R) w" P% x
; Q3 r) ^1 Y& |- ?4 g8 t (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
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# r: M9 X! f" J; Y) b (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。
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(3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。
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(4)取出后放在无尘的地方晾干。
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(5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。, h' S& q$ o, j, a/ \6 v' G) A& |
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(6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。. x* x6 e l* l3 w/ l
6 P4 b. i3 _% [' d) p& e" t (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。" n9 L' z1 j, I* f/ j
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/ n- }* X( m# p- |' M 固定的原理:
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细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。 |
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