iPSC的一个基本问题？求解答！

gxbzjznn

最近在做成纤维细胞向干细胞的诱导重编程！诱导一定天数形成形态很像ES细胞的克隆，连续传代以后能继续稳定形成克隆（更多），但免疫染色结果只能染出Sox9，却染不出Sox2、Oct4、Sox17以及Foxa2,那么请问一下，我这个细胞目前处于一种什么样的状态？具有部分干性？要想得到真正的干细胞，接下来我该往哪个方向努力？求各位大神、前辈、同行指导！

yeshch

我自己也没有重编程过，只是看过实验室其他人做，最好上图片，表明是哪一代，那一天，什么细胞。人的和鼠的差别挺大的。至少OCT4，NANOG应该有的

genedu

首先检验一下抗体是否好用或者失效。其次建议诱导iPSC的时候用OG或者NG的成纤维细胞系，这样一开始就能挑取质量好的单克隆。另外，多挑取几个单克隆系，有的细胞系就是不好，别较真儿

gxbzjznn

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) X! H0 s! D0 ?/ f
" f' I) Z/ n5 b/ _$ x这个真的不太方便放上来 谢谢理解

gxbzjznn

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0 B% D1 ^3 G' l2 x  U, m- b) P7 g  t" Q. ^) z
谢谢你的建议

sunsong7

iXEN（胚外内胚层）

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子/ G: w$ V- |& @3 f( z2 f% t. y

6 i: Q) a) J) D! r! F求进一步解释！谢谢！

sunsong7

extraembryonic endoderm cells （XEN）是细胞重编程过程必经的桥梁
. C7 J' O5 }' N8 c) T$ nZhao, Yang, Zhao, et al. A XEN-like State Bridges Somatic Cells to Pluripotency during Chemical Reprogramming[J]. Cell, 2015, 163(7):1678–1691.
4 d8 |5 \, h3 _7 H- j* f0 u1 W4 tBeyret E, Belmonte J C. The XEN of reprogramming.[J]. Cell Research, 2016.
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sunsong7

Séguin C A, Draper J S, Nagy A, et al. Establishment of Endoderm Progenitors by SOX Transcription Factor Expression in Human Embryonic Stem Cells[J]. Cell Stem Cell, 2008, 3(2):182-95.

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子& f& S  z6 d- m7 t! E9 u. w, E
  V5 w1 d" `+ H* x' G
里面却有明确说明这个过程必须经历Sox9 positive and Sox2 、Oct4、Sox17、Foxa2 negative 过程吗？谢谢