gelatin

carolshen

请问大家都是怎么使用gelatin的呢？ 例如配置的浓度，铺板时间，是否干燥等等……

BIOLOGY

浓度为0.1%，配好高压，用Mili Q水配，高压完放4度冰箱。一般明胶有两种用途，一是悬细胞，也就是去除干细胞中的feeder，这种用途的明胶铺半个小时就够了；另外一种就是养半贴壁的细胞，如Plat E，这种用途的明胶最好过夜。不同培养皿加的量适当即可，覆盖皿底，用前不能干。个人意见，仅供参考。
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carolshen

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: F5 r3 [3 g& c2 }; }; ~嗯，谢谢！

是鸟就要去飞

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请问你们的gelatin是什么牌子的，买时是粉末的么？

heather_lu

Millipore的明胶，0.1%的，500ml 200多元。还挺好用的。

friendly0722

我们实验室是配成10倍的储液。

splinkerette

我们实验室的明胶是omega粉的，用PBS溶，配的储液浓度为1%，灭菌后4°。养ES或者EC细胞的工作液浓度为0.2%，明胶铺半个小时（孵箱中）即可，用之前将明胶吸出，可用PBS洗一遍，也有看过有实验室用培养基洗一遍（个人觉得没必要）；干燥的话，若是不用PBS洗，可以将明胶吸出来后干燥半个小时。6孔板我一般加1ML，10cm皿加5ML（这个量是稍微奢侈了点）。

fish_zbw1985

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* K* L$ s+ _' d$ S) o6 L请问明胶悬细胞去除feeder是怎么做的？谢谢！

BIOLOGY

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0 i# g; F* Y+ K  K0 d; e  ~: l
+ P0 N3 ?. B3 u( R& KSigma的，是粉末

BIOLOGY

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0 E" l, B) d& a' M5 g6 Z7 x6 \7 o1 P
" g0 C8 t' ]- V, L6 Q; O把干细胞和feeder一起消化下来，种在铺好明胶的3.5cm的皿中（把明胶吸干净，加入2ml液体），半个小时后feeder因为比较大就沉的比较快贴明胶上了，悬浮的的就是干细胞，吸出液体离心就可以得到基本无feeder的干细胞了