转基因动物原核注射的注射针如何制作啊？

zpzp0312

原核注射时，DNA注射针怎么制作
+ y5 k* g: u8 i7 ^$ u* q& \, V是不是和ICSI或者ES细胞注射的注射针制作方法有区别
5 }) c# Q- X7 S7 {& ]9 C+ z. \因为它的尖端开口内径要小很多
; A  g2 D" w& R- H2 ?& Z0 Y) r: `我外行，一点也不清楚
, T7 c" |7 Y  t) }; w3 W我就会做ICSI和ES细胞注射的注射针# ^' X( K7 M! k9 k; c
DNA注射针太细，断针时必定会被加热球融化，造成堵塞吧？

yangpan521

不是有拉仪吗?可以设置数据，想要什么样的规格都能拉的出来，建议一些相关资料，这样可以改进，

zpzp0312

回复 yangpan521 的帖子9 \& e+ L  {/ q* x  p  V
  \' V( A' F  _8 I6 Z: A
我的意思是断针，因为针尖内径太小' m! p* L5 a9 F% t  |
断针时容易被玻璃珠融化，堵塞

hualin840518

把断针仪的温度调低一点6 O: g: Y7 H! @$ b
而且在加热铂丝之前最好不要把针接触到玻璃珠7 R% P0 C0 n+ t5 X' G
等温度升起来之后& `9 a3 {0 r/ C( w' q0 I7 k  [
在放大的视野中慢慢的把针靠近玻璃珠（在加热之前要调试好加热时移动的针能正好接触到玻璃珠)+ r9 h1 T. U7 R+ U6 A- _
然后迅速断开加热的电源
4 T3 W# R) W" s+ {: [这样应该就可以了+ R+ U# ]7 J' l4 z9 ?% P% U; q
不过还与做针的熟练程度有关$ K9 B, p1 i: s
我是这样做的
5 y4 h+ Q2 i5 b7 v效果很好！

ambassador

1.玻璃球温度调到30°左右，
9 l% r# }, }( g# {, p# \2.将玻璃针调到与玻璃球同一界面（调至符合口径），! @" S9 w  {% w. s/ K/ @
3.先踩住，使玻璃球升温，
3 v" r( p- s$ n4.然后调节旋钮，将针向玻璃球靠近，贴住，
4 U2 E; w% r' C9 F3 @; o, P5.待玻璃针有弯曲迹象的时候（大约5-8s），瞬间移离玻璃针，此时将煅开玻璃针。) |: J- k; D6 J# r) N5 d% D- w
1 M7 U) l: ?" o9 i
如果上面的protocol还不行，只能怀疑是不是动手操作能力的问题了！

xiaomingxu

楼上两位说的只适合核移植或嵌合体用针，转基因原核注射用针不需要用煅针仪来断的，因为针尖部很细（<1um），不适合用煅针仪来断。 但是拉针仪参数一定要设置好，不同的拉针仪使用参数也不一样，需要摸索。参数设置好后拉出来的针直接可用于原核注射，如果有点堵塞或不通可以在holding上轻微碰碰，使口径稍微增大。

cony

楼上说得没错，最近我们在做原核注射，调查好参数拉出所需针尖喇口径后，再烧角度，烧完就可以了，不用断针。在使用时，将针类在持卵针上蹭一下，蹭出一小 口就行。

POPOLD

不需断针  撞针，就是装好针后 ，注射针撞持卵针

zpzp0312

回复 xiaomingxu 的帖子5 M$ Z' G8 U, b

$ f. L4 J5 d! ~1 K2 n谢谢
5 N. L0 n9 X: f2 B  v" ^看来还是有明白人6 e8 [& a! ]4 Y: H, d) X
前面几位说的都是细胞注射针，呵呵

zpzp0312

回复 cony 的帖子" s( ^6 u+ ~& n+ c
0 K# Y6 s5 ?2 ]- `7 q
谢谢