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培养基颜色怎么变那么快? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2012-3-12 19:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
    DMEM/F12培养基换液后一天后颜色就变成了黄色了,怎么回事啊。配制培养基时PH也是调了的,原来是深红色,培养细胞一天后就变成黄色了,怎么变酸那么快啊。细胞生长的还可以,求高手指点
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沙发
发表于 2012-3-12 22:19 |只看该作者
回复 冰枫de梦 的帖子
- }" y! ]3 \  H- ^6 w9 Q
+ U. ]: I1 U2 ]( R/ i首先培养基变黄不一定是变酸。根据的我经验 培养基变黄有一下几种可能,1,存在污染,2,细胞消耗过大
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藤椅
发表于 2012-3-12 22:33 |只看该作者
Gibco的DMEM/F12培养基本身颜色就不深,养hES的话,加进去的KOSR更是使其变黄,换液一天之后颜色无显著变化,这样是正常的。
) x7 Y9 V0 j) x你这种情况的话,培液你是调过PH的,变黄原因可能有:! _' s$ \! A  {- s7 {9 P
1) 培养箱二氧化碳浓度所产生的酸碱度,正好使该培液呈现你所看到的黄色3 D/ M8 n; P5 ?+ f& @9 i
2) 你细胞太密了
) O5 m( }$ o) V( I: C3)支原体大爆发,检测一下吧
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板凳
发表于 2012-3-13 09:24 |只看该作者
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一般的情况是因为细胞生长营养代谢过快,而且饲养层也是一个主要的消耗源;另外,也有可能是染菌,如果看不到明显的杆菌或者真菌的污染,可能就要想一想是不是支原体的污染。还有,如果你不介意的话,是不是可以将配方传上来看一看什么成分可能导致这个原因。
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报纸
发表于 2012-3-13 10:38 |只看该作者
细胞太密了就会变得特别快 染菌的话好像是变成紫红色哦
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地板
发表于 2012-3-13 11:07 |只看该作者
你培养基是用粉末配置的,还是买的现成的?如果是配置的话,有没有加两性缓冲剂hepes?
& m: A1 Z  _8 M/ G9 o6 J! h& D! fhepes在PH7左右时缓冲能力极强,有助于稳定培养液的PH,我们这配培养液时都会按比例加入hepes的。如果是买的商品化的液体培养液,其中应该含有hepes,那就要查找其他的原因了。
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发表于 2012-3-13 11:51 |只看该作者
回忆一下,配培养基的时候要加NaHCO3粉末,一定要按标准加足量,然后适当使用NaHCO3溶液调节PH值,有的实验室还加上HEPEs缓冲盐,这样培养细胞时,溶液的颜色不会变化很剧烈,如果没有加NaHCO3粉末,直接调的ph值,培养液颜色变化就会很剧烈,这个情况我以前也遇到过,并不是污染了
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金话筒 优秀会员

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发表于 2012-3-13 11:52 |只看该作者
而且,本身,培养液在空气或者CO2环境下,放置一段时间,颜色就会变化,PH也会稍有变化,但是变化很剧烈,很快得话,就说明缓冲能力很差了
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发表于 2012-3-13 12:23 |只看该作者
有可能是培养箱的问题,你可以找厂家的人用专业测二氧化碳浓度的仪器测一下,以前我也遇到过着这样的情况,虽然自己调的浓度是5%,但是一测结果是8%。
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发表于 2012-3-13 23:22 |只看该作者
是明黄色么?3 R3 l, d+ w$ w
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