哪位大侠分过小鼠成体成纤维细胞？

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最近想要做一批。提前谢过。

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1．取材
2 U" r7 E4 d9 Z取取剃毛后的耳缘组织，置于盛放PBS（加双倍双抗）15ml或者50ml的离心管中。
3 W' P1 q! r, c7 ?  m8 B4 M2 f2．材料处理       
6 L' ^/ g  W, Y4 }+ e* J0 L（1）耳缘组织带回实验室后用加有双倍双抗的PBS冲洗后的置于3.5cm培养皿中，用手术刀去除皮毛和骨。
( G! w& J, _" O" f6 Z  }（2）在盛有DPBS的平皿中，用镊子将耳缘组织上残余的毛拔掉，反复清洗，直至DPBS中无任何杂质为止。5 n+ z+ S6 v4 W
（3）将耳缘组织放入一小皿中，尽量将其剪碎，呈糊状，加入少量培养液。
* R0 P7 |, J& o. O9 y3 \3．细胞培养
2 C( G* ?6 h" s$ k: D（1）收集组织块转移至15ml离心管中，离心1000rpm，3min。
0 @; ]8 }; i0 P2 z（2）弃去上清，以培养基重悬组织块，转移至T25培养瓶中，尽量将组织块均匀分布，同时小心吸去组织块周围的培养基。
1 H+ u. M5 \+ {+ Y; E（3）倒置培养瓶37℃过夜培养，次日翻转，加入1.5ml培养基。
6 ?  M: E8 J) J（4）隔日换液，约4日可见组织块周围有细胞爬出
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