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[请教] 哪位大虾有关于囊胚双染的protocal,急用,谢了 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-1-10 00:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
哪位大虾有关于囊胚双染的protocal及注意事项,如果有您染好的图拜看一下就更好了,急用,谢了!

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沙发
发表于 2013-1-10 08:34 |只看该作者
在培养液中加入DAPI或Hoehst使终浓度为1ug/ml,37℃孵育10min,pbs洗3*5min,加PI使终浓度为50ug/ml,4°15min,再洗3*5min,就可以观察照相了,蓝而不红为死细胞!全程避光!!此外为了避免RNA的干扰还可以加点RNase100ug/ml
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藤椅
发表于 2013-1-10 09:28 |只看该作者
回复 希望之光 的帖子' y3 w  \/ K$ ?: o( Z( O4 \
9 y1 s) ]3 |; ~5 |
多谢!您有没有染好的囊胚图,如果不介意的话,贴张图让大家学习学习

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板凳
发表于 2013-1-13 09:08 |只看该作者
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回复 genedu 的帖子
8 X; g) H; o3 G$ R9 a. o% P
' ]$ z5 B% s, M9 V/ B, I1 d呵呵 不好意思 我们实验室有人做 我不做囊胚 回头问他要一张哈

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报纸
发表于 2013-1-14 13:17 |只看该作者
最好用抗体
! F3 U" E/ M3 N! D1 e6 D和一般染色方法相似- i+ k% z# i% S6 D$ A! M
上面的所谓双重染色,看似是节约成本,效果好,其实,这样染色在处理过程中很难控制。甚至是不能控制。
: P1 }( X/ T* [) h2 e5 y4 E发文章上面的图片都是挑出来最好的。* K. ~5 ^' T' m( k+ `: ^
很难有好的重复性。
7 Y" u9 _  m4 Y5 m9 h5 c' ^- V4 Z) f你可以让一个人连着做3个囊胚,每次的结果差别都很大!
, X# d* c( b2 m! k' h& S我做过这个
6 k# G( N$ U( f# a抱质疑态度
" k' j$ V0 ~& k也可能我水平相对低一些
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