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讨论一下影响精原干细胞self-renewal和differentiated的机制以及还有什么研究潜力? [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-25 09:05 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,望各位战友不吝赐教。交流中,摩擦科研火花~~

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沙发
发表于 2013-7-25 10:35 |只看该作者
本帖最后由 20111109 于 2013-7-25 10:46 编辑 9 S4 n0 L1 q' h" _$ J: l
+ D! E) a; A- f7 Z/ @
首先,我知道的精原干细胞更新和分化的调控主要是干细胞的微环境niche,niche中其主要作用的还是sertoli,我们现在所知的sertoli分泌GDNF、FGF2等因子可以促进SSCs对自身stem特性的维持。/ o8 ?0 d) E: Y' D4 O
还有,最近一系列关于miRNA regulate SSCs undifferentiated state 的文章。brinster的microRNA 221 and 222,martin dym的miRNA 20 and 106a,文章附在附件中。
  i5 @; b" Q; j- Z& N1 |7 E) P
) U! ?* d7 y3 C, \; S
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藤椅
发表于 2013-7-27 11:56 |只看该作者
,有  比较好的SSCs分离培养 建系  诱导分化 的protocol  分享下,谢谢。。学习学习

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板凳
发表于 2013-7-29 08:33 |只看该作者
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本帖最后由 20111109 于 2013-7-29 08:34 编辑   D/ g  e" _, }# x

( K" C8 V: B* c( ^0 J% e回复 POPOLD 的帖子
2 Y1 m* A  C, e# V% N
: l# U  L' B1 B' a' \建系的我们使用的是这个:  |% Z* r: }6 p  W) j" C% l3 h

; q% J& F0 w- D1 `9 s
/ a3 V3 R+ }! @) \; r
/ e& N; g3 T4 K: R/ Q" F: i3 ishinohara 的体系- ^0 q0 p5 r. G0 j- ?8 Z+ K

: j! V  g8 F1 ?. Y' H, n" X) k诱导分化的文章没有,如果您找到了,希望您能与我共享~~(*^__^*) 嘻嘻……
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报纸
发表于 2013-7-29 08:35 |只看该作者
大家觉得小分子肽类在精原干细胞中的研究潜力如何?

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地板
发表于 2013-7-29 08:36 |只看该作者
大家觉得小分子肽类在精原干细胞中的研究潜力如何?

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发表于 2013-8-1 14:08 |只看该作者
回复 20111109 的帖子$ ~# v( g  d4 t! K% d1 _: Y0 v

; J/ p/ U9 g4 y很有潜力的。你可以参考最新邓院士的那篇文献,用小分子物质诱导成IPS引起轰动。如果可以拜托用基因改造建立精原细胞系,或者是采用小分子物质进行精原干细胞的诱导分化,都是谢很有意义的工作。(前提是经费充足)
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发表于 2013-8-1 22:28 |只看该作者
本帖最后由 w343989328 于 2013-8-1 22:29 编辑
) `; S  J+ R# o$ h& ?$ l! P: I0 d6 A4 _
由IPS之后,再到MEF诱导为NSC,再到MEF to HSC,我觉得诱导到MEF to SSC应该也是可以期待的一个project,并且能够说明SSC的self-renewal的一些问题。至于小分子,我觉得是一个比较漫长的过程了。IPS也是从逆转录病毒,再到腺病毒,然后是丁胜的单因子,现在是邓宏魁的小分子,是一个循环渐进的过程。
6 U- E) z7 Z( e; h% N9 r, s* j其次,真正的体外分化模型并没有做出来,分化的表型未出,讨论机制为时尚早。2002年science报道过用端粒酶组分tert转染A型精原细胞,成功在体外分化。我一直在追踪这篇文章,但并没有发现后续的发展。
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发表于 2013-8-1 22:32 |只看该作者
终于见到SSC的了,激动一下,大家继续聊,别沉了!

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10
发表于 2013-8-2 23:38 |只看该作者
随着环境污染及生活压力引起的癌症及生殖异常的患病率越来越高+ k$ g7 ]% u( R# v3 J5 A  P
这一点,从各地生殖中心和精子库的生意异常火爆就可以看出来/ K# O7 a& y- ]3 p
其实SSC的研究就迎来一个百年难遇的机遇4 N  k& Q% |8 x( t
但是
% A4 }' S6 q8 u# M, u0 k很多问题困扰着SSC的发展/ d* N6 S- d" ^; J
首先,SSC的特异性marker尤其是特异性表面分子标志就是一个首当其冲,不可忽视的问题* A% i# i  m: {# u% c" M2 h5 S
基本上SSC表达的表面分子标志在睾丸中间质细胞中也表达( g+ \4 k7 t  U+ H7 |* Z% U
剩下几个不在细胞膜表面表达$ a+ g4 v$ X! h1 Z! ]( p1 [
这就带来一个最头疼的问题
- ]& w* z  E' q& G如何分选SSC,目前比较常用的是差速贴壁结合FACS OR MACS; n7 S* P& W( B+ ?' {- @# K0 p) t
但是这些带来的问题是细胞活性活力会有很大的影响,如何分选得到既高纯度又高活性的SSC现在还没有一个特别好的方法;4 d1 W' q4 m; c: x, o. w( g
其次,简单可行的培养体系  t( @4 t" l. Y
目前,SSC的培养体系大多是shinohara体系或优化,体系大多异常复杂,不如ES和IPS体系简单
+ G6 Z, x' _+ M3 X& |/ x8 Q+ ]此外,SSC体外维持大多需要饲养层细胞,将来要应用到临床的时候如何排除饲养层污染也是一个问题9 x: r6 t1 a* C) `4 }! M! ~9 k, |0 }7 P
所以,一个成分明确简单,培养条件简单可行的培养体系亟不可待
1 r, l7 e( Q, b) E1 [( U再次,细胞数目
: I- K1 q" i! e! b- w众所周知,SSC的体内增殖是很慢的,他在体外增殖也是很慢的) O3 @! ]! Z5 g& O" a
那么,用于SSC体外各种机制的研究需要大量的SSC,这些SSC从哪里来是个大问题
4 n  D5 b# D7 V9 ^+ m所以,一个能拿出来供全世界科学家研究的SSC细胞系也是迫不及待的
- ?6 M8 K% o, G2 T虽然有几个小鼠SSC永生化细胞系建立的文献见报道,但是,这些细胞系似乎没有特别充足的证据表明他们就是SSC细胞系,或者他们能输入小鼠睾丸中能重建精子发生,那么这些细胞系都得不到大家的公认,他们也就失去的研究的价值
6 X6 S8 r9 n2 S9 M. _3 Q  G$ `假如有朝一日能解决以上3大问题,我相信SSC的研究就会从模式动物向临床应用往前跨一步。3 J1 i3 c5 e" Z1 [( d7 ]# `
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