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zm19900508

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楼主

发表于 2014-4-10 19:15 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

要用一个基因被双敲的ESCs做实验，需要先确定它仍旧是双敲的，请问该怎么鉴定啊？求详细答案

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沙发

发表于 2014-4-10 19:16 |只看该作者

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zm19900508

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藤椅

发表于 2014-4-11 11:05 |只看该作者

自己顶一下，有知道的帮帮忙

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青后

新手上路

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板凳

发表于 2014-4-11 23:51 |只看该作者

本帖最后由青后于 2014-4-11 23:52 编辑
7 ^/ {3 F2 b- o8 t% G5 ~ R
最简单的在被敲除的点上下游设计PCR引物PCR，带上野生型的当阳性对照，没有模版的当阴性对照，P不出来阳性的带就是敲了。接着还可以弄个可以刺激该基因表达的药或者方法，然后RNA和蛋白检测，没有表达就是敲了。( d3 B0 H0 m8 U4 c& q+ Q) F
或者做DNA杂交是金标准，这个有点小麻烦。