质粒转染效率

yeshch

含目的基因的质粒经过酶切测序鉴定都没问题，但是转染效率总是很低（看GFP荧光），收的病毒暂时不敢用；而且同样的操作，其它的基因转染效率却很高，请问可能是什么原因？

qingxingruyu

相同的表达载体吗，也遇到过这样的问题，但没想过为什么，同样期待有人能给出解释

zb_ming

片段大小也影响转染效率。

luyue6453

回复 yeshch 的帖子
( {2 ~- m- F2 C. ?2 ^) v, T' d) q- w: V  }
转不同的基因肯定出现不同的表达量，有的比较易表达，有的根本还不表达，主要看载体的启动子等调控原件，不行就换转染方法

刘彩云

你用的什么转染方法？脂质体转染效率本来就很低，转不上多少也正常，你可以试试电转。

yeshch

回复 刘彩云 的帖子! X, g0 l% r9 @! `  L

6 E* F9 H( {+ m2 f( A/ c; |我用的钙转；脂质体转染很贵但效率很高啊；电转更贵！

yeshch

回复 luyue6453 的帖子4 {1 m1 Y& _6 k, O5 {

$ _" e% @2 N6 |1 R$ Y2 r嗯哦，谢咯！

creatine

7 ^1 H! {* [6 e' L( @

. `$ r* ]: f- F# Q不知道你做完，有没感染下然后qpcr检测下看下？如果只是荧光的话不一定靠谱。另外以前是不是在保研论坛见过？看你头像一样。

yeshch

5 k3 B$ m/ \9 K4 t4 v' l- g' }0 {, |& S/ t' j, B
回复 creatine 的帖子# d) {2 d* a: v2 A

; H7 g) T* ~& I5 W9 I9 ]& V3 V好像是的，以后继续向你学习

xiaostou

有条件的话试试核转的方法，Lonza出的电转仪，直接转到细胞核内。