无血清培养富集肿瘤干细胞的若干问题

hottodeath

我最近刚开始接触富集肿瘤干细胞，用的是MCF-7，看了大家说的，决定用DMEM/F12，加10ng/mL bFGF ， 20ng/mL EGF，  2%B27，  5μg/mL胰岛素，用低粘附的培养皿，是不是可以了？
# K2 N- f: `" p% a$ V- u# K之前我没加胰岛素，B27也用错了，不是Minus Vitamin A的，还有操作手法等多种原因，没养出来。胰岛素还不知道要买哪种......% m5 ]2 {; D3 I
好多都不清楚啊，周围也没有在做这个的前辈，只能在这里求大家的指教！！！

hottodeath

有看到用胰岛素转铁蛋白亚硒酸钠添加剂（insulin-transferrin-sodiumselenitesupplement，ITS），也有Insulin, Human Recombinant, Zinc Solution的，是不是都可以啊

eanhappy

你们都不加双抗吗

木三阿凉

其他的生长因子都好理解，我想问一下各路大神，这个实验为什么要加胰岛素？

细胞海洋

回复 木三阿凉 的帖子
  c4 R# R' D3 w0 v& y8 ]
5 \& j' F" e9 J建议你发新帖提问

木三阿凉

回复 hottodeath 的帖子3 f3 p6 K: s+ N$ _

- \: l, \4 f( P3 G; V我也有相同疑惑，不知道这个问题你现在解决了没有？

hottodeath

回复 木三阿凉 的帖子
* H! x  Y* A, m/ M* [1 }7 S/ `  z% x' `0 [
我也是在论坛里看到的，MCF7需要insulin，有促进蛋白质合成，促进增殖的作用。现在还在养，无血清培养基培养了5天了，没看到几个活细胞（我种的密度很低）。

木三阿凉

回复 hottodeath 的帖子
. `  O% h- @; w5 A# v
# x+ P- S7 `1 y+ `! \- U0 V哦，MCF-7必须要添加insulin吗

木三阿凉

回复 hottodeath 的帖子
$ i4 w& P8 S- @- O. L7 Z# z, O' v* `3 c. |/ T* I& L, N' D
哦，MCF-7必须要添加insulin吗

hottodeath

回复 木三阿凉 的帖子
5 N# U1 _* M- K3 O
" n% d: b( g2 I2 B: v# V: ?3 k3 X这个我也不清楚。按以上培养的6天了，MCF-7里面球没看到，活细胞也没见几个了，好悲伤。