电转后的成纤维细胞，怎么判定出现了单克隆 - 转基因动物专区干细胞之家

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金话筒优秀版主

楼主

发表于 2015-4-30 15:50 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

大家好，想问一下大家电转后的成纤维细胞，只有G18筛选，若没有荧光标记的话，大家都是怎么判定是否出现单克隆的，希望有做过此类实验的可以发个图片看看。先谢谢啦

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沙发

发表于 2015-5-1 09:26 |只看该作者

细胞铺稀疏一点（铺明胶，培养基加高血清以及BFGF），克隆会长出来，圆形很明显，但是这些都有可能是假阳性的，还是要每个克隆挑出来进行检测，使用玻璃质的克隆环和硅胶，这些millipore，sigma都有售。

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藤椅

发表于 2015-5-1 09:30 |只看该作者

有些实验室是这么处理的：流式筛选阳性细胞，然后铺单细胞。

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