iPSC的一个基本问题？求解答！

gxbzjznn

最近在做成纤维细胞向干细胞的诱导重编程！诱导一定天数形成形态很像ES细胞的克隆，连续传代以后能继续稳定形成克隆（更多），但免疫染色结果只能染出Sox9，却染不出Sox2、Oct4、Sox17以及Foxa2,那么请问一下，我这个细胞目前处于一种什么样的状态？具有部分干性？要想得到真正的干细胞，接下来我该往哪个方向努力？求各位大神、前辈、同行指导！

yeshch

我自己也没有重编程过，只是看过实验室其他人做，最好上图片，表明是哪一代，那一天，什么细胞。人的和鼠的差别挺大的。至少OCT4，NANOG应该有的

genedu

首先检验一下抗体是否好用或者失效。其次建议诱导iPSC的时候用OG或者NG的成纤维细胞系，这样一开始就能挑取质量好的单克隆。另外，多挑取几个单克隆系，有的细胞系就是不好，别较真儿

gxbzjznn

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1 ?" Q8 ^$ V+ [) {; e# [- N0 k7 W" c" g6 V2 k5 ], |
这个真的不太方便放上来 谢谢理解

gxbzjznn

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# u! {/ v: b5 n' {* `- X) c) B5 B/ s
' ^5 L& n) ?! O8 V7 K# F% m+ n* r! ~谢谢你的建议

sunsong7

iXEN（胚外内胚层）

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子6 G" f! b4 `, ^6 o
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求进一步解释！谢谢！

sunsong7

extraembryonic endoderm cells （XEN）是细胞重编程过程必经的桥梁
! s  G, ?* W+ @7 G1 C) AZhao, Yang, Zhao, et al. A XEN-like State Bridges Somatic Cells to Pluripotency during Chemical Reprogramming[J]. Cell, 2015, 163(7):1678–1691., o8 d4 B  w3 s$ W5 \5 Z/ j
Beyret E, Belmonte J C. The XEN of reprogramming.[J]. Cell Research, 2016.
& O' J8 A& v4 Z1 M- V

sunsong7

Séguin C A, Draper J S, Nagy A, et al. Establishment of Endoderm Progenitors by SOX Transcription Factor Expression in Human Embryonic Stem Cells[J]. Cell Stem Cell, 2008, 3(2):182-95.

gxbzjznn

回复 sunsong7 的帖子  x! {  W: e1 l1 [

+ Z. S1 @# x9 j/ N* ~7 ?里面却有明确说明这个过程必须经历Sox9 positive and Sox2 、Oct4、Sox17、Foxa2 negative 过程吗？谢谢